রিটাট্রুটাইড(লিঙ্ক:https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/peptide/retatrutide-powder-cas-2381089-83-2.html) হল একটি রাসায়নিকভাবে সংশ্লেষিত দীর্ঘ-অভিনয়কারী GLP-1R/GIPR/GCGR পলিপেপটাইড অ্যাগোনিস্ট, যা প্রাপ্তবয়স্কদের টাইপ 2 ডায়াবেটিস, ওজন ব্যবস্থাপনা এবং নন-অ্যালকোহলিক ফ্যাটি লিভার/নন-অ্যালকোহলিক স্টেটোহেপাটাইটিসের চিকিৎসার জন্য তৈরি। এই পণ্যটির প্রাপ্তবয়স্কদের টাইপ 2 ডায়াবেটিসের জন্য ইঙ্গিতটি 29 আগস্ট, 2023-এ ক্লিনিকাল ব্যবহারের জন্য অনুমোদিত হয়েছে। উপরন্তু, নন-অ্যালকোহলিক ফ্যাটি লিভার/নন-অ্যালকোহলিক স্টিটোহেপাটাইটিসের জন্য ইঙ্গিতগুলির ক্লিনিকাল নিবন্ধনের আবেদন চূড়ান্ত পর্যালোচনা পর্যায়ে রয়েছে। বিশ্বে আটটি GLP-1R/GIPR/GCGR অ্যাগোনিস্ট বিকাশের অধীনে রয়েছে, যার মধ্যে রিটা'স রেটাট্রুটাইড সবচেয়ে দ্রুত অগ্রগতি করেছে এবং এই বছরের জুন মাসে তৃতীয় পর্যায়ের ক্লিনিকাল ট্রায়াল চালু করেছে। একই মাসে, রিটা ঘোষণা করেন যে রিটাট্রুটাইডের দ্বিতীয় পর্যায়ের গবেষণা তথ্য ADA-র বার্ষিক সভায় প্রকাশ করা হয়েছিল, যা দেখায় যে 24 সপ্তাহে, retatrutide (1 mg, 4 mg, 8 mg বা 12 mg) কার্যকারিতার প্রধান প্রান্তে পৌঁছেছে। 17.5% গড় ওজন হ্রাস সহ ডায়াবেটিস ছাড়া স্থূল বা অতিরিক্ত ওজনের অংশগ্রহণকারীদের জন্য মূল্যায়ন। সেকেন্ডারি এন্ডপয়েন্টগুলির মধ্যে, 48 সপ্তাহের চিকিত্সার শেষে গড় ওজন হ্রাস 24.2% অর্জন করা হয়েছিল। আমরা প্রকাশিত পদ্ধতির উপর ভিত্তি করে পরীক্ষাগারে পেপটাইড সংশ্লেষিত করেছি। নির্দিষ্ট সংশ্লেষণ পদ্ধতি সংক্ষিপ্তভাবে বর্ণনা করা হবে, এবং নির্দিষ্ট পদক্ষেপ ইমেলের মাধ্যমে আমাদের কাছে পাঠানো যেতে পারে।
পদ্ধতি 1:
পরীক্ষাগারে সলিড-স্টেট সংশ্লেষণ ব্যবহার করে Retarutide সংশ্লেষণের জন্য বিস্তারিত পদক্ষেপগুলি নিম্নরূপ:
প্রয়োজনীয় রিএজেন্ট এবং যন্ত্র প্রস্তুত করুন: অ্যামিনো অ্যাসিড, ডাইক্লোরোমেথেন, পটাসিয়াম কার্বোনেট, ইথোক্সিলেটেড সিলিকা জেল, অ্যাসিটোনিট্রিল, পাইরিডিন, এন-মিথাইলমরফোলিন, ডাইসোপ্রোপিলেথাইল ক্লোরাইডের উৎস, ট্রাইফ্লুরোএসেটিক অ্যাসিড, ডিআইপিইএ, বোক অ্যাসিড এবং অন্যান্য সুরক্ষিত অ্যাসিডের মতো। , ঘূর্ণমান evaporators এবং অন্যান্য যন্ত্র.
(1) Boc সুরক্ষিত অ্যামিনো অ্যাসিডের সংশ্লেষণ: প্রয়োজনীয় অ্যামিনো অ্যাসিডগুলি ডাইক্লোরোমেথেনে দ্রবীভূত করুন, পটাসিয়াম কার্বনেট পাউডার যোগ করুন, সমানভাবে নাড়ুন, ইথোক্সিলেটেড সিলিকা জেল যোগ করুন, নাড়তে থাকুন এবং তারপরে Boc সুরক্ষিত অ্যামিনো অ্যাসিড পেতে পাইরিডিন এবং এন-মিথাইলমারফোলিন যোগ করুন।
(2) সলিড ফেজ সংশ্লেষণ: অ্যাসিটোনিট্রিল, ডাইসোপ্রোপাইলথাইল ক্লোরাইড উত্স এবং ট্রাইফ্লুরোএসেটিক অ্যাসিড একসাথে মিশ্রিত করুন, সমানভাবে নাড়ুন, প্রস্তুত Boc সুরক্ষিত অ্যামিনো অ্যাসিড যোগ করুন এবং কঠিন ফেজ সংশ্লেষণ পণ্যটি পেতে নাড়তে থাকুন।
(3) ডিপ্রোটেকশন গ্রুপ: ডিক্লোরোমেথেনে কঠিন ফেজ সংশ্লেষণ দ্রবীভূত করুন, ট্রাইফ্লুরোএসেটিক অ্যাসিড যোগ করুন, সমানভাবে নাড়ুন এবং তারপর ডিআইপিইএ যোগ করুন। অরক্ষিত কঠিন ফেজ সংশ্লেষণ পেতে নাড়তে থাকুন।
(4) পরিশোধন: পানিতে অরক্ষিত কঠিন ফেজ সংশ্লেষণ দ্রবীভূত করুন, সোডিয়াম হাইড্রক্সাইড দ্রবণ দিয়ে pH প্রায় 9 তে সামঞ্জস্য করুন। ইথার সঙ্গে বিশুদ্ধ পণ্য বর্ষণ.
পদ্ধতি 2:
পরীক্ষাগারে তরল ফেজ সংশ্লেষণ ব্যবহার করে Retarutide সংশ্লেষণের বিস্তারিত পদক্ষেপগুলি নিম্নরূপ:
প্রয়োজনীয় রিএজেন্ট এবং যন্ত্র প্রস্তুত করুন: আর্জিনাইন, গ্লাইসিন, অ্যাসিটিক অ্যানহাইড্রাইড, ট্রাইথাইলামাইন, পটাসিয়াম কার্বনেট, ডাইক্লোরোমেথেন, মিথানল, পাইরিডিন, এন-মিথাইলমরফোলিন, অ্যাসিটিক অ্যানহাইড্রাইড, সোডিয়াম অ্যাসিটেট এবং অন্যান্য রিএজেন্ট, সেইসাথে যন্ত্রগুলি যেমন সেপারার, স্টিরার, ভ্যাকুয়াম পাম্প, ওভেন এবং ক্রোমাটোগ্রাফিক কলাম।
(1) ডাইক্লোরোমেথেনের উপযুক্ত পরিমাণে আর্জিনাইন এবং গ্লাইসিন দ্রবীভূত করুন, উপযুক্ত পরিমাণে অ্যাসিটিক অ্যানহাইড্রাইড এবং ট্রাইথাইলামাইন যোগ করুন এবং একটি আলোড়নের নীচে সমানভাবে নাড়ুন।
(2) দ্রবীভূত মিশ্রণটিকে একটি ওভেনে স্থানান্তর করুন এবং অ্যামিনো অ্যাসিডের অবশিষ্টাংশগুলিকে অ্যাসিটাইলেট করতে 1 ঘন্টার জন্য 80 ডিগ্রি সেলসিয়াসে গরম করুন।
(3) সোডিয়াম অ্যাসিটেট তৈরির জন্য দ্রবণে অ্যাসিটিক অ্যাসিডকে নিরপেক্ষ করার জন্য পটাসিয়াম কার্বনেট পাউডারের সাথে প্রতিক্রিয়াযুক্ত দ্রবণকে নিরপেক্ষ করুন এবং তারপরে ডিক্লোরোমেথেন দিয়ে উৎপন্ন পেপটাইড বের করুন।
(4) নিষ্কাশিত পেপটাইড দ্রবণকে মিথানল দিয়ে ধুয়ে ফেলুন এবং অপরিশোধিত পেপটাইড পেতে ভ্যাকুয়াম পাম্প দিয়ে ফিল্টার করুন।
(5) অপরিশোধিত পেপটাইডকে যথাযথ পরিমাণে পাইরিডিন এবং এন-মিথাইলমরফোলিন দ্রবীভূত করুন, উপযুক্ত পরিমাণে অ্যাসিটিক অ্যানহাইড্রাইড এবং সোডিয়াম অ্যাসিটেট যোগ করুন এবং একটি আলোড়নের নীচে সমানভাবে নাড়ুন।
(5) একটি ভ্যাকুয়াম পাম্প দিয়ে প্রতিক্রিয়াযুক্ত দ্রবণটি ফিল্টার করুন, মিথানল দিয়ে ফিল্টার কেকটি ধুয়ে ফেলুন, এবং তারপরে চূড়ান্ত Restarutide পাওয়ার জন্য একটি ভ্যাকুয়াম পাম্প দিয়ে ফিল্টার করুন৷
পদ্ধতি 3:
গবেষণাগারে রাসায়নিক পদ্ধতি ব্যবহার করে Retarutide সংশ্লেষণের বিস্তারিত পদক্ষেপগুলি নিম্নরূপ:
প্রয়োজনীয় রিএজেন্ট এবং যন্ত্র প্রস্তুত করুন: আর্জিনাইন, গ্লাইসিন, অ্যাসিটিক অ্যানহাইড্রাইড, ট্রাইথাইলামাইন, পটাসিয়াম কার্বনেট, ডাইক্লোরোমেথেন, মিথানল, পাইরিডিন, এন-মিথাইলমরফোলিন, অ্যাসিটিক অ্যানহাইড্রাইড, সোডিয়াম অ্যাসিটেট এবং অন্যান্য রিএজেন্ট, সেইসাথে যন্ত্রগুলি যেমন সেপারার, স্টিরার, ভ্যাকুয়াম পাম্প, ওভেন এবং ক্রোমাটোগ্রাফিক কলাম।
(1) ডাইক্লোরোমেথেনের উপযুক্ত পরিমাণে আর্জিনাইন এবং গ্লাইসিন দ্রবীভূত করুন, উপযুক্ত পরিমাণে অ্যাসিটিক অ্যানহাইড্রাইড এবং ট্রাইথাইলামাইন যোগ করুন এবং একটি আলোড়নের নীচে সমানভাবে নাড়ুন।
(2) দ্রবীভূত মিশ্রণটিকে একটি ওভেনে স্থানান্তর করুন এবং অ্যামিনো অ্যাসিডের অবশিষ্টাংশগুলিকে অ্যাসিটাইলেট করতে 1 ঘন্টার জন্য 80 ডিগ্রি সেলসিয়াসে গরম করুন।
(3) সোডিয়াম অ্যাসিটেট তৈরির জন্য দ্রবণে অ্যাসিটিক অ্যাসিডকে নিরপেক্ষ করার জন্য পটাসিয়াম কার্বনেট পাউডারের সাথে প্রতিক্রিয়াযুক্ত দ্রবণকে নিরপেক্ষ করুন এবং তারপরে ডিক্লোরোমেথেন দিয়ে উৎপন্ন পেপটাইড বের করুন।
(4) নিষ্কাশিত পেপটাইড দ্রবণকে মিথানল দিয়ে ধুয়ে ফেলুন এবং অপরিশোধিত পেপটাইড পেতে ভ্যাকুয়াম পাম্প দিয়ে ফিল্টার করুন।
(5) অপরিশোধিত পেপটাইডকে যথাযথ পরিমাণে পাইরিডিন এবং এন-মিথাইলমরফোলিন দ্রবীভূত করুন, উপযুক্ত পরিমাণে অ্যাসিটিক অ্যানহাইড্রাইড এবং সোডিয়াম অ্যাসিটেট যোগ করুন এবং একটি আলোড়নের নীচে সমানভাবে নাড়ুন।
(6) একটি ভ্যাকুয়াম পাম্প দিয়ে প্রতিক্রিয়াযুক্ত দ্রবণটি ফিল্টার করুন, মিথানল দিয়ে ফিল্টার কেকটি ধুয়ে ফেলুন, এবং তারপরে চূড়ান্ত Restarutide পাওয়ার জন্য একটি ভ্যাকুয়াম পাম্প দিয়ে ফিল্টার করুন৷
লক্ষ্য অণু প্রাপ্ত করার জন্য একাধিক জৈব সংশ্লেষণ প্রতিক্রিয়া প্রয়োজন। উপরন্তু, এই পদ্ধতিতে একাধিক জৈব বিকারক এবং জটিল অপারেটিং অবস্থার ব্যবহার করা হয়, তাই পরীক্ষাগারে রোটারুটাইডের রাসায়নিক সংশ্লেষণ সাধারণত বড় আকারের উৎপাদন বা শিল্প প্রয়োগের জন্য উপযুক্ত নয়। বড় আকারের উৎপাদন বা শিল্প প্রয়োগের জন্য, সাধারণভাবে ব্যবহৃত পদ্ধতি হল জৈব সংশ্লেষণ বা তরল ফেজ সংশ্লেষণের মতো সংশ্লেষণ পদ্ধতির মাধ্যমে রোটারুটাইড প্রস্তুত করা, যা পরীক্ষাগার স্কেলে তুলনামূলকভাবে ছোট, অপারেশনে তুলনামূলকভাবে সহজ এবং অল্প পরিমাণে পণ্য প্রস্তুত করার জন্য উপযুক্ত। . এই পদ্ধতিগুলি দ্বারা প্রাপ্ত Retarutide রাসায়নিক পদ্ধতি দ্বারা সংশ্লেষিত Retarutide এর গঠন এবং জৈবিক কার্যকলাপের অনুরূপ বা অনুরূপ, কিন্তু উচ্চ ফলন এবং সহজ প্রস্তুতির সুবিধা রয়েছে। একই সময়ে, তাদের আরও ভাল শিল্পায়নের সম্ভাবনা এবং বৃহত্তর প্রয়োগের সম্ভাবনা রয়েছে।
পদ্ধতি 4:
গবেষণাগারে জৈবিক পদ্ধতি ব্যবহার করে Retarutide সংশ্লেষণের জন্য বিস্তারিত পদক্ষেপগুলি নিম্নরূপ:
প্রয়োজনীয় জিন এবং রিএজেন্টের প্রস্তুতি: জিন লাইব্রেরি থেকে রেটাট্রুটাইড জিন ধারণকারী প্লাজমিডগুলি প্রাপ্ত করুন, প্রাপক কোষের সাথে প্লাজমিডগুলিকে রূপান্তর করুন (যেমন এসচেরিচিয়া কোলি), এবং রেটাট্রুটাইড জিন ধারণকারী ইঞ্জিনিয়ারিং ব্যাকটেরিয়া প্রাপ্ত করুন।
(1) প্রকৌশল ব্যাকটেরিয়া চাষ করা: উপযুক্ত তাপমাত্রা, pH, এবং আয়ন ঘনত্বের অবস্থার অধীনে, প্রকৌশল ব্যাকটেরিয়া চাষ করার জন্য একটি সংস্কৃতির মাধ্যম ব্যবহার করুন, যাতে তারা প্রচুর পরিমাণে প্রসারিত হতে পারে।
(2) Retarutide নিষ্কাশন: চাষ করা ইঞ্জিনিয়ারিং ব্যাকটেরিয়া একটি ক্রাশার ব্যবহার করে চূর্ণ করা হয়, এবং অশোধিত পণ্য প্রাপ্ত করার জন্য ultrafiltration এবং sedimentation এর মতো পদ্ধতি ব্যবহার করে কোষের টুকরোগুলি Retarutide থেকে আলাদা করা হয়।
(3) Retarutide পরিশোধন: অপরিশোধিত Retarutide উচ্চ-বিশুদ্ধ Retarutide প্রাপ্ত করার জন্য ক্রোমাটোগ্রাফি প্রযুক্তি ব্যবহার করে বিশুদ্ধ করা হয়।
রোটারুটাইড সনাক্তকরণ এবং সনাক্তকরণ: বিশুদ্ধ রোটারুটাইডের গঠন সনাক্ত এবং সনাক্ত করতে উচ্চ-কার্যকারিতা তরল ক্রোমাটোগ্রাফি, ভর স্পেকট্রোমেট্রি, পারমাণবিক চৌম্বকীয় অনুরণন এবং অন্যান্য কৌশল ব্যবহার করুন।
পরীক্ষাগারে Retarutide এর জৈবিক সংশ্লেষণের জন্য রাসায়নিক বিক্রিয়া সমীকরণটি প্রধানত জিনের প্রকাশ প্রক্রিয়ার সময় রাসায়নিক বিক্রিয়াকে জড়িত করে, যার মধ্যে দুটি ধাপ রয়েছে: প্রতিলিপি এবং অনুবাদ।
ট্রান্সক্রিপশন: ডিএনএ ডাবল স্ট্র্যান্ডেড খোলে, আরএনএ স্ট্র্যান্ডগুলিকে সংশ্লেষণ করতে একটি টেমপ্লেট হিসাবে একটি স্ট্র্যান্ড ব্যবহার করে, যার জন্য আরএনএ পলিমারেজের জড়িত থাকা প্রয়োজন। প্রতিক্রিয়া সমীকরণটি নিম্নরূপ:
DNA ডাবল স্ট্র্যান্ডেড: DNApol → mRNA+DNApol
অনুবাদ: পেপটাইড চেইন সংশ্লেষিত করার জন্য রাইবোসোমগুলি এমআরএনএর সাথে আবদ্ধ হয়, একটি প্রক্রিয়া যার জন্য অ্যামিনো অ্যাসিড এবং শক্তির অংশগ্রহণ প্রয়োজন। প্রতিক্রিয়া সমীকরণটি নিম্নরূপ:
রাইবোসোম+mRNA → পেপটাইড চেইন+GDP+Pi+H2O
পেপটাইড চেইন+ATP → পেপটাইড চেইন+AMP+PPi
তাদের মধ্যে, DNApol প্রতিনিধিত্ব করে DNA পলিমারেজ; MRNA বার্তাবাহক RNA প্রতিনিধিত্ব করে; রাইবোসোম রাইবোসোম প্রতিনিধিত্ব করে; পেপটাইড চেইন পলিপেপটাইড চেইন প্রতিনিধিত্ব করে; জিডিপি গুয়ানোসিন ডিফসফেট প্রতিনিধিত্ব করে; পাই অজৈব ফসফরিক অ্যাসিড প্রতিনিধিত্ব করে; H2O জল প্রতিনিধিত্ব করে; ATP এডিনোসিন ট্রাইফসফেট প্রতিনিধিত্ব করে; এএমপি অ্যাডেনোসিন মনোফসফেট প্রতিনিধিত্ব করে; পিপিআই অজৈব পাইরোফসফেট প্রতিনিধিত্ব করে। এই প্রতিক্রিয়াগুলি রেটারুটাইডের সংশ্লেষণের জন্য প্রয়োজনীয় পেপটাইড চেইনগুলি তৈরি করে, যা পরবর্তী পর্যায়ে প্রক্রিয়াজাত করা হয় এবং রিটারুটাইড পাওয়ার জন্য পরিবর্তিত হয়।
উপরোক্তগুলি পরীক্ষাগারে রোটারুটাইডের সংশ্লেষণের জন্য সাধারণ পদ্ধতি, প্রতিটির বিভিন্ন সুবিধা, অসুবিধা এবং ব্যবহারের সুযোগ রয়েছে। গবেষণাগারে সাধারণত গবেষণা ও পরীক্ষামূলক ব্যবহারের জন্য ছোট আকারের উৎপাদনের জন্য তরল ফেজ সংশ্লেষণ এবং কঠিন পর্যায় সংশ্লেষণ পদ্ধতি ব্যবহার করা হয়; অন্যদিকে শিল্প উৎপাদন, বাজারের চাহিদা মেটাতে বড় আকারের উৎপাদনের জন্য জৈবসংশ্লেষণ এবং তরল/কঠিন পর্যায়ের উৎপাদনের সমন্বয় গ্রহণ করে। এটি লক্ষ করা উচিত যে এই পদ্ধতিগুলির জন্য চূড়ান্ত পণ্যের গুণমান এবং বিশুদ্ধতা নিশ্চিত করার জন্য কঠোর শর্ত অপ্টিমাইজেশন এবং প্রক্রিয়া নিয়ন্ত্রণ প্রয়োজন।